蛋白質藥物制劑的粘度測定

蛋白質藥物制劑的基本劑型為注射劑和凍干粉針劑。藥物溶液或混懸液一般通過胃腸外途徑注射給藥，注射方式包括靜脈（IV）注射、皮下（SC）或肌內（IM）注射等。與靜脈注射相比，皮下或肌內給藥方式可有效減少給藥時間，降低治療成本，提高患者順應性且改善患者和醫(yī)療服務提供者的方便性。皮下（通常低于約2ml）或肌內（通常低于約5ml）注射需要小體積，所以必須對蛋白質溶液進行濃縮以提高制劑的有效蛋白質劑量。隨著濃度的增加，蛋白質分子在溶液中會發(fā)生聚集、變形、交聯(lián)、脫酰胺、異構化、氧化及剪裁等現(xiàn)象，導致粘度呈現(xiàn)近似指數(shù)及的上升。過高的粘度會增加蛋白質制劑的制備及使用難度，導致患者注射部位的不適反應，在一定程度上影響蛋白質制劑的物理和化學穩(wěn)定性。由于蛋白質的高粘度和其他性質所帶來的問題，多種藥學上重要的高分子量蛋白質諸如單克隆抗體目前經由靜脈輸注給藥的方式遞送高劑量的蛋白質。

通過添加粘度降低劑，降低蛋白質制劑的粘度有助于提高泵送、濃縮、過濾等加工工藝的效率；降低制劑的注射力，改善制劑的可注射性和/或患者順應性、方便性和舒適性，避免引起給藥部位的刺激跡象；增加制劑中蛋白質的濃度及給藥靈活性，降低蛋白質的給藥頻率；提高制劑的生物利用度；影響藥物動力學，有效降低給藥劑量的Cmax（指在給藥劑量后且在給藥后續(xù)劑量前的最大血漿濃度），使制劑毒性降低。因此，優(yōu)化蛋白質藥物制劑的配方，降低溶液粘度，是蛋白質藥物開發(fā)中至關重要的。

測試儀器

本文使用DVNext錐板流變儀（如圖1所示）測量一種高濃縮低粘度的液體蛋白質藥物制劑的粘度。幫助用戶建立蛋白質制劑的生產及制備工藝過程中產品質量控制的粘度測試方法，并Rheocalc T軟件連接主機，進行程序編輯及數(shù)據(jù)采集，繪制粘度變化曲線。

圖1：DVNext錐板流變儀

錐板流變儀適用于微量樣品的粘度測試，測試所需樣品體積僅為0.5-2.0 mL（具體的樣品量與所使用的轉子型號相關），可有效節(jié)約測試成本；錐板流變儀使用錐形轉子及配套的樣品杯，可以計算精確的剪切率和剪切應力，得到絕對粘度；樣品杯中內置RTD溫度探針，通過外接循環(huán)水浴，可實現(xiàn)測試過程中樣品溫度的控制和測量；由于樣品量很少，可快速恒溫，有效提高測試效率。TC-650 AP循環(huán)水浴系統(tǒng)（圖1-1）的控溫精度最高可達0.01℃，為粘度測試提供準確及穩(wěn)定的溫度條件。

圖1-1：TC-650 AP循環(huán)水浴

方法與結果

調節(jié)錐板流變儀的轉子與樣品杯之間的間隙，然后吸取一定量的液體蛋白質制劑于錐板流變儀的樣品杯中，連接流變儀主機和TC-650 AP水浴循環(huán)系統(tǒng)，設置測試溫度為25℃。在Rheocalc T 軟件上編輯相應的測試程序，待樣品溫度穩(wěn)定后開始測量。選擇“Multi Point"模式進行數(shù)據(jù)采集，觀察測試過程中數(shù)據(jù)讀取及溫度控制的穩(wěn)定性。根據(jù)圖2可知，使用水浴控溫時，測試穩(wěn)定性非常好，12個數(shù)據(jù)點的粘度平均值為26.19 cP，RSD僅為0.05%。扭矩讀數(shù)平均值為43.6%，表明可以使用該測試方法進行產品的粘度控制。